BioLife无DMSO辅料级HypoThermosol FRS低温保存液：用于MSCs 2-8℃低温保存研究

01   前言

细胞保存是细胞治疗领域的重要环节，它涉及到确保细胞在保存后仍保持活力和功能。传统上，细胞保存通过将细胞置于低温环境中来实现，例如2-8°C以减缓代谢，或-196°C的液氮中以阻止生物活动。然而，这些低温环境都会导致细胞损伤，影响细胞活力和功能恢复。

 

02   细胞保存策略

在开发商业细胞治疗产品时，需要考虑新鲜制剂和冷冻制剂的优缺点。细胞治疗供应链主要有两种模型：

1. 冷冻运输模型: 细胞在收集后进行冷冻保存，并在需要时解冻使用。这需要训练有素的医护人员和适当的设备配置。
2. 新鲜运输模型: 细胞在中央制造设施中配制，并以新鲜液体的形式低温保存运输到护理中心。这减少了医护人员和设备的需求，但需要更快的交货时间和严格的物流控制。

 

图1 - 细胞治疗制剂的两种应用场景：冻存制剂VS新鲜制剂

 

03   2-8℃低温保存的挑战

许多研究表明，与室温保存相比，2-8°C 低温保存可以促进多种细胞类型的恢复和稳定性。然而，当细胞低温保存超过24小时后，通常会发生明显的活力和功能恢复丧失。因此，延长低温保存的稳定性对于细胞治疗产品十分重要。

 

04   研究目的

本研究旨在评估不同保存介质对 hMSCs 在 2-8°C 低温保存后的活力和功能恢复的影响，并强调使用合适的生物保存溶液的重要性。

 

05   实验方法

• 使用人间充质干细胞 (hMSCs) 作为模型系统。
• 测试了两种类型的保存介质：

1. 含胞外存储保护剂的保存液：MSC基础培养基、Normosol-R、PlasmaLyte A、AQIX 和 Celsior。
2. 含胞内存储保护剂的保存液：ViaSpan 和 HypoThermosol FRS (HTS-FRS)。

• 将 hMSCs 种植在 96 孔板中，并使用不同的保存介质进行 1-7 天的 2-8°C 低温保存。
• 保存后，评估细胞的形态、线粒体功能、活力和分化能力。

 

06   实验结果

 

图2 - 比较不同储存介质对低温储存后hMSC恢复的效果FRS (HTS-FRS) (A)、ViaSpan(B)、Normosol-R (C)和Plasma-Lyte (D)等

 

图2中是MSCs分别保存在四组低温贮藏剂中在低温贮藏1天(第1行)和3天(第2行)后的形态学结果显示。图中第三行是通过荧光显微镜下F-actin (Alexa Fluor 488 phalloidin)染色;绿色)和核(Hoechst 33342;蓝色)在低温储存3天后的形态展示。

 

• 与其他保存介质相比，HTS-FRS 能较大幅度提高 hMSCs 的活力和功能恢复。
• HTS-FRS 保存的 hMSCs 在低温保存后仍保持完整的细胞骨架和正常的形态。
• HTS-FRS 保存的 hMSCs 具有更高的活细胞回收率和代谢活性。

 

07   结论

• HTS-FRS 是一种有效的 hMSCs 2-8°C 低温保存介质，可提高细胞的活力和功能恢复。
• 使用 HTS-FRS 可以延长 hMSCs 的保存时间，并提高细胞的质量和安全性，从而推动细胞治疗行业的发展。

 

 

Biolife公司HypoThermosol 2-8℃生物保存介质

• 2-8℃生物组织细胞保存介质；
• cGMP制造，无DMSO、无血清、无蛋白、无动物源性成分；
• 减轻细胞和组织冻融过程中发生的温度诱导的分子细胞应激反应，用于客户研究和临床应用；
• 为细胞治疗起始源材料和最终细胞制剂的运输提供了长达多天的细胞和组织储存。

 

关注曼博生物公众号：Mine-Bio，查看更多技术文章！